移動端
直播推薦
回放
回放
企業(yè)動態(tài)
- 湖南方盛制藥股份有限公司采購佳航的JH-D2102全自動膏藥軟化點測定儀
- 杭州優(yōu)科生物科技有限公司采購佳航全自動熔點儀Digipol-M80
- 北京大學(xué)集成電路學(xué)院與華測儀器攜手，正式簽定高壓薄膜極化合作協(xié)議!
- 上海華為數(shù)字能源公司與簽定華測儀器高阻高壓表
- 福建正味生物科技有限公司采購佳航全自動熔點儀Digipol-M70
- 宿遷禾潤昌公司在我司定購HCDJC-50KV電壓擊穿試驗儀
- 江蘇知美美妝集團有限公司采購佳航的全自動密度計Digipol-D50
- 梓夢- 世界中醫(yī)藥學(xué)會聯(lián)合會經(jīng)皮給藥專委會第十屆學(xué)術(shù)會議圓滿結(jié)束
推薦展會
密度梯度離心（isodensity centrifugation method）又稱為區(qū)帶離心。
該方法的優(yōu)點是可以同時使樣品中幾種或全部組分分離，具有良好的分辨率，分離效果好，可一次獲得較純組分。
缺點是離心時間較長，需制備梯度液，操作要求高。
按照離心分離原理，密度梯度離心又可分為速率區(qū)帶離心法(rate zonal centrifugation method，R-Z)和等密度離心法 (isopycnic centrifugation method)。
速率區(qū)帶離心也可稱為等區(qū)密度離心，是根據(jù)樣品中不同組分粒子所具有的不同的體積大小和不同的沉降系數(shù)將混合樣品進行離心分離提純。
離心時將需要分離的樣品溶液置于由密度梯度材料(如蔗糖、氯化銫 (CsCI)、溴化鈉等)形成的梯度液柱上面，樣品粒子的密度必須大于梯度液柱中任一點的密度，否則無法得到理想的區(qū)帶離心效果。離心時，混合樣品中不同的組分將在梯度液柱的不同位置分別形成各自的區(qū)帶，選擇適合的轉(zhuǎn)速和時間進行離心，當(dāng)各組分區(qū)帶距離拉得遠時，結(jié)束離心，然后將區(qū)帶取出。這樣只需通過一次離心就可以把混合樣品中的各組分分離提純，其純度和回收率均可滿足要求。
優(yōu)點是一次分離純化，組分的沉降系數(shù)相差 20% 以上的即可選用此法，分辨力高，操作熟練可以將組分沉降系數(shù)相差 5%～10% 的樣品很好的分離。
缺點是材料的條件限制，樣品液濃度不能太高，否則操作條件很難控制，同時此法與差速離心法相比，處理樣品的量要小的多。
圖 1 速率區(qū)帶離心
速率區(qū)帶離心的時間必須嚴格控制，不能太短，否則樣品區(qū)帶不清，時間也不能太長，否則待分離組分可能沉底。需要分離的樣品顆粒的沉降速度取決于顆粒形狀、大小、密度及離心力等因素。離心前后樣品的狀態(tài)如圖 1 所示。
速率區(qū)帶離心經(jīng)典的應(yīng)用就是通過蔗糖密度梯度離心，進行各種亞細胞器(核糖體、線粒體、Exosome 等)和病毒顆粒(病毒載體、疫苗等)的純化。例如，我們在上一期中得到的 70S 核糖體沉淀，經(jīng)過水解后，可利用蔗糖密度梯度離心，進一步分離純化得到 50S 和 30S 的兩個亞基。具體的實驗流程如下：
離心課堂正在連載，持續(xù)關(guān)注了解更多離心方法！
關(guān)注往期離心課堂
□
□
□
□
□
□
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
浙公網(wǎng)安備 33010602002722號
2025北京軍工展|第十四屆國防信息化裝備與技術(shù)博覽會
展會城市：北京市展會時間：2025-06-12