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【儀器網(wǎng) 產(chǎn)品文庫】DNA合成儀設(shè)計(jì)用于合成結(jié)構(gòu)上類似DNA或RNA的寡核苷酸的自動(dòng)化儀器。一般應(yīng)用于固相合成法，每次將一個(gè)核苷酸加到所接長的寡核苷酸鏈上，加入每一個(gè)核苷酸都利用相同的化學(xué)反應(yīng)與相應(yīng)的嘌呤或嘧啶堿基衍生物作用。所用化學(xué)反應(yīng)和操作細(xì)節(jié)隨不同的儀器而改變，廣泛應(yīng)用的方法是DNA合成的磷酸酰胺法。
合成原理：
DNA的固相合成:即DNA3\'端固定于基質(zhì)上，然后沿3\'向5\'方向依次添加核苷酸直至合成所需的DNA片段。不同于應(yīng)用DNA聚合酶的DNA合成。
合成過程:
di一個(gè)堿基的3‘末端固定在樹脂上，下一個(gè)堿基的5’-OH用二對(duì)甲氧三苯甲基DMT保護(hù)，堿基上的氨基用苯甲酸保護(hù)，然后對(duì)3‘-OH用氨基磷酸化合物進(jìn)行活化。
1.1個(gè)堿基的5’-OH和下個(gè)堿基的3‘-OH形成亞磷酸三酯，
2.然后用dian氧化成磷酸三酯
3.加入二lv乙酸除去第二個(gè)堿基5’-OH上的保護(hù)劑DMT
循環(huán)進(jìn)行加入下一個(gè)堿基合成完畢后
1.用苯硫酚除去5’-OH上的保護(hù)劑DMT
2.用濃氫氧化銨將片段與固體樹脂斷開，洗脫
3.用濃氫氧化銨在加熱的條件下除去堿基上的保護(hù)劑
4.除去氫氧化銨，真空抽干
5.液相色譜或者PAGE，回收片段長的。
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