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流式細胞儀的流動室維護和保養(yǎng)

   2016年10月21日 14:46  
  流式細胞儀(Flow cytometer)是對細胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量,并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把的細胞亞群從中分選出來。多數(shù)流式細胞計是一種零分辨率的儀器,它只能測量一個細胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指標,而不能鑒別和測出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是說,它的細節(jié)分辨率為零。
  
  了解如何正確地維護和保養(yǎng)流動室,可zui大化延長流動室的性能和使用期限。而不正確的使用和維護,則可能產(chǎn)生不正確的讀數(shù)和數(shù)據(jù),而且會使得你不停呼叫工程師甚至更換流動室或光路。
  
  一、需避免的化學(xué)物質(zhì)
  
  目前大部分流動室都是由石英或熔融石英制作而成,故需避免pH值大于9.5的堿性溶液非常重要。這些溶液可能腐蝕石英,使其變毛糙,影響光學(xué)性能。一旦使用過堿性溶液,在流動室的通路上可能會看到一些被腐蝕的條紋,如果這些條紋剛好位于激光器檢測點,那么就可能影響檢測準確性。
  
  二、如何避免結(jié)晶
  
  避免結(jié)晶很重要。為了避免流動室內(nèi)液體結(jié)晶,需經(jīng)常用水沖洗。在跑完緩沖液或生理鹽水之后,尤其是高pH值的溶液后,*沖洗十分必要。有些流動室內(nèi)部會包被一些特殊材料,以防止真菌或結(jié)晶生長。
  
  三、清洗
  
  清洗流動室和光路連接器對于任何流式細胞儀的正確運行都十分重要。其中zui重要的一點就是別讓流動室的液體干掉,而含有鹽分、蛋白或其它固態(tài)溶解物的液體,均可能損傷液路。
  
  的清潔方式就是用充滿10%表面活性劑的針頭連接流動室,將活性劑注入流動室,多次注射后,將液體留在流動室內(nèi)至少2小時。zui后關(guān)機前,流動室必須*用蒸餾水充滿。
  
  如果流動室只是過夜,第二天馬上就用,那么可以用buffer充。
  
  如果要過一個周末或長時間不用,那么建議使用蒸餾水或20%乙醇充。
  
  四、操作和使用中的注意事項
  
  1.光電倍增管要求穩(wěn)定的工作條件,暴露的較強的光線下以后,需要較長時間的“暗適應(yīng)”以消除或降低部分暗電流本底才能工作;另外還要注意磁屏蔽;
  
  2.光源不得在短時間內(nèi)(一般要1h左右)關(guān)上又打開;使用光源必須預(yù)熱并注意冷卻系統(tǒng)工作是否正常;
  
  3.液流系統(tǒng)必需隨時保持液流暢通,避免氣泡栓塞,所使用的鞘流液使用前要經(jīng)過過濾、消毒;
  
  4.注意根據(jù)測量對象的變換選用合適的濾片系統(tǒng)、放大器的類型等;
  
  5.特別強度每次測量都需要對照組。

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