別名：實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒;Quantitative Real-time PCR Kit;Realtime PCR Kit；RT-PCR Kit
英文名稱(chēng)：2×SYBR Green PCR Mastermix
規(guī)格：50T ; 200T
儲(chǔ)存條件：-20℃，避光，有效期1年
單位：盒

2×SYBR Green PCR Mastermix試劑組成：

      2×SYBR Green PCRmix 含有 PCR Buffer、MgCl2、dNTPs、HS Taq DNA Polymerase、SYBRGreen I、穩(wěn)定劑等成分。 

2×SYBR Green PCR Mastermix產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 

      2×SYBR Green PCRmix 是采用 SYBR Green ? 嵌合熒光法進(jìn)行 Real Time PCR 的專(zhuān)用試劑。含有常溫下封閉 Taq 酶活性的化學(xué)修飾法熱啟動(dòng) HS Taq DNA Polymerase，能夠有效抑制低溫條件下引物非特異性退火或者引物二聚體引起的非特異性擴(kuò)增，提高擴(kuò)增反應(yīng)的特異性。

       本試劑經(jīng)過(guò)特殊配制，采用優(yōu)化配方的 qPCR 專(zhuān)用 Buffer，大大提高了 qPCR 反應(yīng)的擴(kuò)增效率和檢測(cè)靈敏度，可以在較寬的定量區(qū)域內(nèi)得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，準(zhǔn)確進(jìn)行定量。

       本試劑與多數(shù)廠家的熒光定量 PCR儀兼容，如 Applied Biosystems、 Eppendorf 、Bio-Rad 和 Roche 等。 

試劑原理： 

       本產(chǎn)品利用化學(xué)修飾熱啟動(dòng)酶 HS Taq DNA polymerase 進(jìn)行 qPCR 擴(kuò)增反應(yīng)，通過(guò)擴(kuò)增產(chǎn)物嵌合 SYBR Green ? 而激發(fā)的熒光信號(hào)強(qiáng)度進(jìn)行檢測(cè)。 

       1、PCRPCR 法是以微量 DNA 進(jìn)行目的片段擴(kuò)增的方法。通過(guò) DNA 鏈的熱變性、引物退火、DNA 聚合酶作用下引物的延伸三個(gè)步驟循環(huán)往復(fù)，可在短時(shí)間內(nèi)擴(kuò)增大量 DNA 片段。 

        2、熒光檢出SYBR Green I 是一種結(jié)合于小溝中的雙鏈 DNA 結(jié)合染料。與雙鏈 DNA 結(jié)合后，其熒光大大增強(qiáng)，最大吸收波長(zhǎng)約為 497nm，發(fā)射波長(zhǎng)最大約為 520nm。SYBR Green I 可以與所有的雙鏈 DNA 相結(jié)合，無(wú)需使用探針，即可實(shí)現(xiàn)檢測(cè)，通用性好，且靈敏度很高。

       但是，由于 SYBR Green I 與所有的雙鏈 DNA 相結(jié)合，因此由引物二聚體、單鏈二級(jí)結(jié)構(gòu)以及錯(cuò)誤的擴(kuò)增產(chǎn)物引起的假陽(yáng)性會(huì)影響定量的精確性。在定量?jī)x器檢測(cè)過(guò)程中，可以通過(guò)測(cè)量升高溫度后熒光的變化，由解鏈曲線(xiàn)來(lái)分析產(chǎn)物的均一性，從而區(qū)分產(chǎn)物的融解峰溫度而區(qū)分特異與非特異的產(chǎn)物。