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zl-056627 小鼠胚胎成纖維細胞3T6-Swiss albino

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  細胞名稱3T6-Swissalbino(小鼠胚胎成纖維細胞)


  種屬小鼠


  年齡(性別)胚胎


  組織來源胚胎;成纖維細胞生長特性貼壁細胞形態(tài)成纖維細胞樣背景描述3T6-Swissalbino細胞是于1963年從分解的瑞士小鼠胚胎中建立的,3T6-Swissalbino細胞能分泌膠原質(zhì)和透明質(zhì)酸。檢測表明,3T6-Swissalbino細胞肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。


  生長培養(yǎng)基DMEM高糖+10%FBS+1%P/S


  培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%溫度:37℃


  細胞收到后處理:


  細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)淖睿?/span>辦法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi),嚴格無菌操作,培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的*培養(yǎng)液收集至離心管中,加入6ml*培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時,根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。(注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松,傳代后建議一瓶用原瓶里面的*培養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的*培養(yǎng)基)


  細胞培養(yǎng)步驟:


  1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。


  2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。


  1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:


  1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。


  2.加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化。


  3.輕輕吹打細胞,*脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。


  4.按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。



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