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液相色譜分離柱應(yīng)該如何維護(hù)?

   2020年07月13日 14:46  
  【儀器網(wǎng) 維修保養(yǎng)】色譜技術(shù)是一種分離分析手段,液相色譜儀的分離是在色譜分離柱中實(shí)現(xiàn)的,因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱就是色譜系統(tǒng)的心臟。色譜柱通常由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成,如何保護(hù)好分離柱及減少柱的污染是延長色譜柱壽命的關(guān)鍵。
 
  一、色譜柱的維護(hù)
 
  1、加保護(hù)柱(預(yù)柱)。保護(hù)柱是根內(nèi)裝填料與分離柱性質(zhì)相近的短柱,接在分離柱前或代替流路過濾器。保護(hù)柱的作用是收集和阻塞分離柱口的化學(xué)垃圾,如果這些垃圾直接進(jìn)入分離柱會逐漸堆積在柱頭,就會降低柱效能。
 
  2、保護(hù)柱是消耗品,一般在分析50個樣品后需更換新柱芯。
 
  3、避免高壓沖擊分離柱。一般色譜柱都能承受得起高壓,但經(jīng)不住突然變化的高壓沖擊,會改變柱床體積,進(jìn)而影響柱效。引起高壓沖擊的原因主要有:進(jìn)樣器樣品閥轉(zhuǎn)動緩慢、泵啟動太快與柱切換等操作。
 
  二、合理選擇分離柱
 
  選擇色譜分離柱主要根據(jù)有兩點(diǎn),一是根據(jù)待測組分的分子量大??;二是根據(jù)流動相條件,包括PH值、離子強(qiáng)度和溶劑極性等。
 
  1、傳統(tǒng)硅膠基質(zhì)的鍵合相柱要求流動相PH值在3-7之間,PH值(>8) 的流動相能溶解硅膠使鍵合相流失。所以一定要根據(jù)分析的對象、流動相的條件選擇合適的分離柱。
 
  2、定期沖洗分離柱。每次分析工作結(jié)束時,沖洗完緩沖鹽后要過度到用強(qiáng)溶劑沖洗柱子,如色譜純甲醇等可以沖去吸附在柱上的強(qiáng)保留組分。
 
  三、減少柱的污染
 
  1、純化樣品。樣品純化的越干凈,分離柱的壽命就越長;反之只有提取沒有純化的樣品,分離柱柱效下降較快。
 
  2、建立一套有效的色譜分析和樣品前處理方法、特別是在分析血漿和尿液樣品時,要特別注意樣品的提取與純化,盡量使處理過的樣品中雜質(zhì)(如大分子蛋白、有機(jī)物等)降到低,以保護(hù)柱頭和柱子。
 
  3、提取純化好的樣品應(yīng)用流動相來溶解,一方面可以減少色譜圖中的溶劑峰干擾,另一方面也能夠檢查樣品在流動相中的溶解性,如果樣品進(jìn)樣后在流動相中沉淀就會堵塞進(jìn)樣器和柱頭,甚至樣品分解出現(xiàn)怪峰。如果出現(xiàn)樣品與流動相不溶要設(shè)法改變?nèi)芙鈼l件,如更換樣品溶劑、改進(jìn)樣品處理方法、過濾或者去除不溶性物質(zhì)。

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