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【儀器網(wǎng) 產(chǎn)品文庫】接下來小編為大家介紹下PCR擴增儀分為哪幾類
根據(jù)DNA擴增的目的和檢測的標(biāo)準(zhǔn)，可以將PCR儀分為普通PCR儀，梯度PCR儀，原位PCR儀，實時熒光定量PCR儀四類。
1. 普通PCR儀
一次PCR擴增只能運行一個特定退火溫度的PCR儀稱作傳統(tǒng)PCR儀，也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運行。主要是用于簡單的、對目的基因退火溫度的擴增。該儀器主要應(yīng)用于科學(xué)研究、教學(xué)、醫(yī)學(xué)臨床、檢驗檢疫等機構(gòu)。
2. 梯度PCR儀
一次性PCR擴增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度，通常有12種溫度梯度)的PCR儀稱作梯度PCR儀。因為被擴增的不同DNA片段，其zui適退火溫度是不同的，通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進行擴增，從而一次性PCR擴增，就可以篩選出表達量高的zui適退火溫度，進行有效的擴增。用于研究未知DNA退火溫度的擴增，這樣節(jié)約成本的同時也節(jié)約了時間。梯度PCR儀在不設(shè)置梯度的情況下也可以做普通PCR擴增。主要應(yīng)用于科研、教學(xué)機構(gòu)。
3. 原位PCR儀
用于從細胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細胞內(nèi)基因擴增儀稱作原位PCR儀。如病源基因在細胞的位置或目的基因在細胞內(nèi)的作用位置等。是保持細胞或組織的完整性，使PCR反應(yīng)體系滲透到組織和細胞中，在細胞的靶DNA所在位置上進行基因擴增。不但可以檢測到靶DNA，又能標(biāo)出靶序列在細胞內(nèi)的位置，對于在分子和細胞水平上研究疾病的發(fā)病機理和臨床過程及病理的轉(zhuǎn)變有重大的實用價值。主要應(yīng)用于臨床、科研。
4. 實時熒光定量PCR儀
在普通PCR儀的基礎(chǔ)上增加一個熒光信號采集系統(tǒng)和計算機分析處理系統(tǒng)的PCR儀稱作熒光定量PCR儀。其PCR擴增原理和普通PCR儀擴增原理相同，只是PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標(biāo)記，使用引物和熒光探針同時與模板特異性結(jié)合擴增。擴增的結(jié)果通過熒光信號采集系統(tǒng)實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統(tǒng)得出量化的實時結(jié)果輸出。把這種PCR儀叫做實時熒光定量PCR儀(qPCR儀)。熒光定量PCR儀有單通道、雙通道和多通道。當(dāng)只用一種熒光探針標(biāo)記的時候，選用單通道，有多熒光標(biāo)記的時候用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標(biāo)記的目的基因表達產(chǎn)物，因為一次只能檢測一種目的基因的擴增量，需多次擴增才能檢測完不同目的基因片段的量。主要用于醫(yī)學(xué)臨床檢測、生物醫(yī)藥研發(fā)、食品行業(yè)、科研院校等機構(gòu)。
根據(jù)DNA擴增時升溫介質(zhì)的不同可以將PCR儀分為：變溫鋁塊式PCR儀、水浴式PCR儀和變溫式流式PCR儀。
1. 變溫鋁塊式PCR儀
熱源用電阻絲、導(dǎo)電熱膜、熱泵式珀爾帖半導(dǎo)體元件制作，讓帶有凹孔的鋁塊升溫，用自來水、制冷壓縮機或半導(dǎo)體降溫。優(yōu)點：溫度傳導(dǎo)快，各管的擴增一致性好；反應(yīng)管規(guī)格一致時無須外涂石蠟油；可用微電腦調(diào)節(jié)溫度轉(zhuǎn)換；儀器制冷部件可以在完成擴增后降溫至4℃，保存樣品過夜。缺點：管內(nèi)反應(yīng)液溫度比鋁塊顯示溫度滯后；須使用特制且與鋁塊凹孔形狀緊密吻合的薄壁耐熱反應(yīng)管；變溫時難以快速克服鋁塊的熱容量；壓縮機制冷啟動慢、重量大、滯后時間長。
2. 水浴式PCR儀
儀器本身有3個不同溫度的水浴，用機械裝置將帶有反應(yīng)管的架子移位和升降溫度，使溫度循環(huán)。優(yōu)點：水為傳熱介質(zhì)，溫度易恒定，熱容量大；反應(yīng)管形狀無特殊要求，溫度轉(zhuǎn)換較快擴增效果穩(wěn)定；具有較高的運行效率，擴增產(chǎn)物特異性好。缺點：高溫浴不穩(wěn)定，水面需用液體石蠟覆蓋；改變水浴溫度所需時間較長，不易實施復(fù)雜程序(如套式PCR)的操作，儀器體積較大；室溫影響溫度下限。
3. 變溫式流式PCR儀
依據(jù)空氣流的動力學(xué)原理，以冷熱氣流為介質(zhì)升降溫度。優(yōu)點：變溫迅速，擴增效果好，適合于微量、快速PCR；反應(yīng)器不受形狀限制，管外無需涂液體石蠟；測定管內(nèi)液體溫度作為控溫依據(jù)，顯示溫度真實可靠；易于用微電腦設(shè)定復(fù)雜的變溫程序；易于制成重量較輕的便攜式儀器，適合外出作業(yè)。缺點：以室溫為溫度下限，低溫難控制，對空氣流的動力學(xué)要求較高，需精心設(shè)計才能使各管溫度均勻。
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展會城市：株洲市展會時間：2025-05-08