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【微光譜應用】Ocean HR2吸光度及分辨率測評

OIA MKT 蔚海光學 2023-03-02 14:29 發(fā)表于江蘇

“Ocean HR2憑借其專有的CCD陣列探測器和低雜散光光學平臺設(shè)計，為從等離子體監(jiān)測到藥物分析等各種應用提供了優(yōu)異的光譜性能。本次測試，我們關(guān)注Ocean HR2吸光度線性度以及高分辨率性能。”

▎關(guān)于Ocean HR2

Ocean HR2高分辨率光譜儀結(jié)構(gòu)緊湊，堅固耐,用，積分時間快至1μs，熱波長穩(wěn)定性——漂移小于每攝氏度0.06個像素，可在溫度變化時保證可靠的光譜性能。它涵蓋 ~190-1150 nm 內(nèi)各種波長范圍，可選狹縫尺寸，以幫助用戶控制光通量和光學分辨率。

高分辨率光譜儀Ocean HR2與海洋光學光源、附件和軟件兼容，允許用戶針對不同的應用優(yōu)化。此外，每臺Ocean HR2光譜儀都配有Ocean Direct，這是個功能強大的跨平臺軟件開發(fā)工具包，帶有應用程序編程接口。

▎吸光度測量：重鉻酸鉀標準品

為測試Ocean HR2吸光度線性度，測量了重鉻酸鉀吸光度標準品，每種樣品的濃度水平都不同。

測量吸光度實驗包括海洋光學HR2-UV-VIS光譜儀、帶衰減器的DH-2000氘燈光源、兩根400 μm光纖，石英比色皿、Square One比色皿支架和OceanView軟件。

圖1. 重鉻酸鉀標準品的紫外吸光度（濃度范圍20.27-100.95 mg/L）

圖1為使用Ocean HR2測得的紫外吸收譜，可看出Ocean HR2出色的低雜散光性能,特別是當繪制與濃度關(guān)系時，其吸光度線性度為0.9997（圖2）。

圖2. 高吸光度線性度是Ocean HR2光譜儀的一個特點。

藍色線為重鉻酸鉀標準品的測量結(jié)果，基于該標準曲線，可預測該波長范圍內(nèi)1.5AU以下幾乎任何樣品的濃度。

▎吸光度測量：牛血清白蛋白BSA

牛血清蛋白（BSA）常用作生化應用中的蛋白質(zhì)濃度標準品。下面使用與重鉻酸鉀實驗相同的Ocean HR2光譜儀配置，在蒸餾水中測量了質(zhì)量同為503mg的30種不同濃度的BSA。

為確保獲得zui,佳測量結(jié)果，建議在實驗中應注意以下：

● 測量前，將光譜儀和光源預熱30分鐘。預熱有助于光源達到熱平衡狀態(tài)，避免由于光源輸出的微小變化而導致的測量偏差。

● 采樣時避免取下石英比色皿，因為這樣做可能會引入錯誤。正確的做法是，在比色皿中進行溶液稀釋，使用一次性移液管吸取每個樣品的一部分，然后在去離子水中混合，并對每個樣品重復該過程。

● 同時，還建議避免測量中移動光纖。

圖3. BSA樣品在 279 nm 處有強烈的吸收峰。

使用BSA測量的吸光度線性度結(jié)果甚至比重鉻酸鉀更,好。取279 nm處的吸收峰（圖3），吸光度直至2.5,AU，也能保證吸光度線性度0.999（圖4）。這種性能使Ocean HR2成為定量其他類型的蛋白質(zhì)濃度及生物應用，如分析血液成分和對藥,物配方進行質(zhì)量保證的jue佳選擇。

圖4. 近30個BSA樣品上測得的吸光度線性度高達0.999。

▎高分辨率的Ocean HR2：識別譜線

由于光學平臺優(yōu)化設(shè)計，Ocean HR2分辨率（FWHM）通常小于1nm。例如在測量汞氬燈氣體放射光源時，在UV-VIS波段觀察到很多明確的尖峰（圖5）。

圖5. 根據(jù)配置，可使用Ocean HR2實現(xiàn)亞納米級光學分辨率。

在測太陽輻照度時觀察到類似的光學分辨率性能，25μm狹縫的Ocean HR2在其光譜范圍內(nèi)檢測到光學分辨率小于1.2nm的光譜發(fā)射線（圖6）。

采樣配置包括一個連接到600μm VIS-NIR光纖的余弦校正器，該光纖被放置在反射探頭支架中，并以90°對著天空。

圖6. Ocean HR2光譜儀在太陽輻照度測量中展示了其多,功能性。

結(jié)語

從檢測等離子體和氣體中的窄發(fā)射線到確定蛋白質(zhì)的濃度，Ocean HR2 光譜儀在實驗室或生產(chǎn)線上提供研究級光譜儀性能，能夠勝任研究或系統(tǒng)集成的苛刻要求。

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