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全自動凱氏定氮儀作為測定蛋白質(zhì)的重要儀器，廣泛應用于乳與乳制品等農(nóng)產(chǎn)品和食品中蛋白質(zhì)含量的測定。它具有高靈敏度、分析速度快、應用范圍廣、所需試樣少、設備和操作比較簡單等特點，下面來介紹凱氏定氮儀的使用經(jīng)驗。
1、開機之前
保證各個溶液能夠滿足此次試驗測定，檢查去離子水，堿液和接收液的使用情況，以及廢液桶中廢液得到了及時的清理。如果在去離子水，堿液和接收液的液位低于液位傳感器的話，或廢液的液位高于液位傳感器的話，儀器將報警，正在進行的試驗將被停止，影響測定工作的正常進行。
2、開機之前，保證冷卻水的開關是打開了。
如果冷卻水開關關閉，儀器雖然能自檢通過，但是在蒸餾過程中，由于蒸餾裝置的溫度太高，儀器將報警，提示打開冷卻水開關。打開冷卻水開關后，儀器將繼續(xù)工作。但此次試驗被停止，影響正常測定的同時，在沒有冷卻水保護的情況下，對蒸餾裝置具有損傷。
3、等1.1和1.2確認無誤后開機，儀器自檢，自檢通過后，儀器進入等待選擇程序階段。
首*入手動模式對滴定器中的氣泡進行排除。氣泡的存在會影響測定結(jié)果，因為氣泡進入后，會占據(jù)標準滴定酸的體積，使標準滴定酸的體積減小，測定結(jié)果偏低。
排除氣泡的方法是：
首先打開儀器前蓋，儀器報警，提示儀器前蓋被打開，找一塊小磁鐵放在儀器前面的觸點上，按面板上回車鍵，此時儀器默認前蓋關閉。將儀器功能選擇滴定器充液，滴定器活塞向上移動停止后，用收捏住滴定器的塑料軟管，選擇滴定器排空，滴定器活塞向下移動，等移動3~5秒后立刻松手，滴定器中氣泡將上浮至滴定器上端，選擇滴定器充液，氣泡被排除滴定器，反復2~3次，將氣泡排凈后開始測定。
4、空白的測定
在空白測定時，首先測定水空白，水空白的測定是為了檢查儀器的穩(wěn)定程度。當前后兩次空白測定值小于0.05且水空白值小于0.2時，儀器穩(wěn)定。測定試劑空白，并將空白值輸入儀器。如果不先測定水空白而直接測試劑空白，即在儀器不穩(wěn)定的情況下就進行試劑空白的測定，將會得到偏高的試劑空白值，測定結(jié)果將偏低。
5、樣品測定
5.1稱樣
牛乳樣品需要混合均勻后取樣，因為牛乳樣品容易脂肪上浮，不事先混合而直接從上層取樣的話，測定結(jié)果將偏低。乳粉樣品混合均勻后用稱量紙稱量，并用鑷子送如消化管底部。因操作不當殘留在管壁上的樣品，在加入硫酸的時候用硫酸沖入消化管底部。如果殘留在管壁上而不用硫酸沖入的話，將會使測定結(jié)果偏低。
5.2消化
在加酸的過程中，要考慮到樣品的組成對消耗酸量的影響。酸量小，樣品消化不*，測定結(jié)果偏低；酸量大，在上機過程中與堿中后酸過量，游離胺不能被蒸餾出來，嚴重影響測定結(jié)果。
在消化過程中，先220℃預消化1小時，然后將溫度升高到420℃。預消化的目的是讓樣品和硫酸先緩慢的反應。不預消化，濃硫酸將和樣品在高溫下劇烈反應，造成炭化，測定結(jié)果將偏低，炭化造成的顆粒還會在排廢過程中堵塞管路，造成儀器不能正常工作。
6、回收率的測定
采用硫酸銨和尿素分別對回收率進行測定。單純的采用硫酸銨，簡單快速，不要要消化，但只能保證儀器測定的部分，而不能對前處理的消化過程進行質(zhì)量體系保證。尿素需要消化進行測定，對前處理和儀器測定部分全程進行質(zhì)量保證。
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