W632細(xì)胞小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)活性強(qiáng)
DMEM-H: Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 胎牛血清，10%消化3-5分鐘。1:3。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿(mǎn)。*培養(yǎng)基+8%DMSO公司細(xì)胞的簡(jiǎn)潔信息：
（1）儲(chǔ)存：液氮。
（2）運(yùn)輸：干冰。
（3）用途：只可用于科研。
（4）第二代培養(yǎng)末期液氮凍存。
（5）W632細(xì)胞小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞貼壁懸浮ATCC每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)：>5×105 cells/1ml。
（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
收到W632細(xì)胞小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞貼壁懸浮ATCC后的處理：
1）收到細(xì)胞后，首先觀察瓶身是否完好（注意有無(wú)縫隙，裂痕）。
2）顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況，有無(wú)細(xì)胞漂浮。
3）用新潔爾滅消毒瓶口及瓶身。
4）打開(kāi)瓶口，再次用新潔爾滅消毒瓶口（可能會(huì)有液體溢出，注意不要碰到液體），酒精燈烤瓶口消毒。
5）將培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至50ml離心管或廣口瓶中（若細(xì)胞漂浮嚴(yán)重，離心培養(yǎng)基，1000g*5分鐘，將離心后的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至另一個(gè)大離心管中，留一點(diǎn)吹打細(xì)胞沉淀成懸液，回收細(xì)胞至原培養(yǎng)瓶），若漂浮不嚴(yán)重，亦離心一下。
6）在原培養(yǎng)瓶中留一部分原裝培養(yǎng)液，再補(bǔ)加自己新配的培養(yǎng)基至適當(dāng)容積，例如4ml，讓細(xì)胞適應(yīng)一下環(huán)境。 當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到70-80%，凍存大部分，小部分傳代。
RS1990 PANC-1 人胰腺癌細(xì)胞 詢(xún)價(jià) ATCC
RS2000 PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3] 雜交瘤細(xì)胞CD25 詢(xún)價(jià) ATCC
RS2010 PC-12 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 詢(xún)價(jià) ATCC
RS2020 PC-3 人前列腺癌細(xì)胞 詢(xún)價(jià) ATCC
RS2030 PIEC 豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 詢(xún)價(jià) ATCC
RS2040 PK136 小鼠（B細(xì)胞）X小鼠（骨髓瘤細(xì)胞） 詢(xún)價(jià) ATCC
RS2050 PLC/PRF/5 人肝癌亞力山大細(xì)胞 詢(xún)價(jià) ATCC
RS2060 Psi2 DAP 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 詢(xún)價(jià) ATCC
RS2070 Pt K1 (NBL-3) 袋鼠腎細(xì)胞 詢(xún)價(jià) ATCC
RS2080 QG-56 人肺扁平上皮癌細(xì)胞 詢(xún)價(jià) ATCC
RS2090 QGY-7701 人肝癌細(xì)胞 詢(xún)價(jià) ATCC
RS2100 QGY-7703 人肝癌細(xì)胞 詢(xún)價(jià) ATCC
RS2110 QSG-7701 人肝細(xì)胞 詢(xún)價(jià) ATCC
RS2120 R 1610 倉(cāng)鼠肺細(xì)胞 詢(xún)價(jià) ATCC
RS2130 RAG 小鼠腎腺癌細(xì)胞 詢(xún)價(jià) ATCC
RS2140 Raji 人Burkitt's 淋巴瘤細(xì)胞 詢(xún)價(jià) ATCC
RS2150 RAW 264.7 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞 詢(xún)價(jià) ATCC
RS2160 RBL-2H3 大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞 詢(xún)價(jià) ATCC
RS2170 RD 人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞 詢(xún)價(jià) ATCC
RS2180 Reh 人急性非B 非T 淋巴細(xì)胞白血病 詢(xún)價(jià) ATCC
RS2190 RF/6A 猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞 詢(xún)價(jià) ATCC0294-1G 碘硝基四唑紫 高純級(jí) 1G 146-68-9 5 years IODONITROTETRAZOLIUM CHLORIDE (INT)
0294-500MG 碘硝基四唑紫 高純級(jí) 500MG 146-68-9 5 years IODONITROTETRAZOLIUM CHLORIDE (INT)
0298-50G 阿利新藍(lán) 8 GX 高純級(jí) 50G 33864-99-2 4 years ALCIAN BLUE 8 GX
0298-100G 阿利新藍(lán) 8 GX 高純級(jí) 100G 33864-99-2 4 years ALCIAN BLUE 8 GX
H102-1000ML 1000ML
H131-201 201
0302-1G 亞麻酸 超純級(jí) 1G 463-40-1 5 years LINOLENIC ACID
0302-5G 亞麻酸 超純級(jí) 5G 463-40-1 5 years LINOLENIC ACID
0304-5G 硫酸* 組織培養(yǎng)級(jí) 5G 1405-41-0 2 years GENTAMYCIN SULFATE
0304-10G 硫酸* 組織培養(yǎng)級(jí) 10G 1405-41-0 2 years GENTAMYCIN SULFATE
0305-1KG 碳酸銨 ACS級(jí) 1KG 506-87-6 4 years AMMONIUM CARBONATE & MIXTURE
0325-50G 腺苷 高純級(jí) 50G 58-61-7 2 years ADENOSINE
0325-100G 腺苷 高純級(jí) 100G 58-61-7 2 years ADENOSINE
0326-1KG 草酸,二水 高純級(jí) 1KG 6153-56-6 4 years OXALIC ACID, DIHYDRATE
0326-500G 草酸,二水 高純級(jí) 500G 6153-56-6 4 years OXALIC ACID, DIHYDRATE
K296-5G 5G
K296-100G 100G
0329-1G 氯化硝基四氮唑藍(lán) 超純級(jí) 1G 298-83-9 2 years NBT
0329-500MG 氯化硝基四氮唑藍(lán) 超純級(jí) 500MG 298-83-9 2 years NBT
0329-5G 氯化硝基四氮唑藍(lán) 超純級(jí) NBT
0330-500G 硫酸銅,五水 ACS級(jí) 500G 7758-99-8 4 years CUPRIC SULFATE, PENTAHYDRATE
產(chǎn)品名稱(chēng)：W632細(xì)胞小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞貼壁懸浮ATCC
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
A.W632細(xì)胞小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞貼壁懸浮ATCC直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體)：
(1) 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞，800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測(cè)即可。
(4) 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
B. 未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
(1)收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
(5)加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測(cè)。
(7)流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
C.細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備：
(1)待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
(3)調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
