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己糖激酶(HK)活性檢測試劑盒產(chǎn)品說明:
HK(EC 2.7.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是葡萄糖分解過程中的第一個關(guān)鍵酶,催化葡萄糖轉(zhuǎn)化為6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途徑的交叉點。
HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步催化6-磷酸葡萄糖脫氫生成NADPH,NADPH 在340nm有特征吸收峰。
注意:實驗之前建議選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品:紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。
注意事項:
1. 比色皿中反應(yīng)液的溫度必須保持 37℃,取小燒杯一只裝入一定量的 37℃蒸餾水,將此燒杯放入 37℃水浴鍋中。在反應(yīng)過程中把比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中。
2. 最好兩個人同時做此實驗,一個人比色,一個人計時,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。
3. 不同勻漿組織中HK 活力不一樣,做正式試驗之前請做1-2次預(yù)試驗,若ΔA>0.5,則說明組織活力太高,必須用提取液稀釋成適當(dāng)濃度勻漿上清液,或縮短反應(yīng)時間至2min,使ΔA<0.5,以提高檢測靈敏度。注意同步修改計算公式。
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BC0540/BC0545 丙酮酸激酶(PK)活性檢測試劑盒
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