TE緩沖液(pH=8.0)Tris +EDTA緩沖液,這種緩沖液我們一般用作溶解劑或保持劑,主要是調控PH。TAE是一種電泳緩沖液,主要用于DNA分子的電泳。
TE組成濃度:10mM Tris-HCl 1mM EDTA PH=8.0
配制量:500ml
配制方法:
量取下列溶液于500ml燒杯中 1M Tris-HCl Buffer PH=8.0 5ml 0.5M EDTA PH=8.0 1ml 向燒杯中加入約400mldd H2O均勻混合;將溶液定容到500ml后;室溫保存.
TAE是使用廣泛的緩沖系統(tǒng)。其特點是超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子質量(TBE中電泳時測出的相對分子質量會大于實際分子質量),且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%,電泳大于13kb的片段時用TAE緩沖液將取得更好的分離效果,此外,回收DNA片段時也易用TAE緩沖系統(tǒng)進行電泳。
TAE的缺點是緩沖容量小,長時間電泳(如過夜)不可選用,除非有循環(huán)裝置使兩極的緩沖液得到交換。 50×TAE Buffer TE緩沖液(pH=8.0)配制方法:
1. 稱量Tris 242g,Na2EDTA.2H2O 37.2g 于1L燒杯中;
2.向燒杯中加入約800ml去離子水,充分攪拌均勻;
3加入57.1ml的冰乙酸,充分溶解;
4.加去離子水定容至1L后,室溫保存。