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ibidimRNA轉(zhuǎn)染試劑 60500 60501

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mRNA的瞬轉(zhuǎn)試劑,能在15-30后檢測到蛋白質(zhì)合成 
高轉(zhuǎn)染效率,針對原代細胞(例如,HUVEC和神經(jīng)元)和干細胞的轉(zhuǎn)染試劑 
快速mRNA導(dǎo)入技術(shù),無胞吞作用及溶酶體的降解影響,不需要將基因?qū)爰毎藘?nèi) 
低的細胞毒性 
 

mRNA翻譯和降級研究 
蛋白質(zhì)生化研究:合成,折疊,處理,穩(wěn)定性,定位,降解 
mRNA轉(zhuǎn)染進入原代細胞中不需要基因修飾的組織 
采用RNA-only CRISPR/Cas技術(shù)進行基因組改造工程 
 

全新的mRNA活細胞轉(zhuǎn)染試劑 
15-30分鐘能完成mRNA轉(zhuǎn)染 
不需要胞吞過程 
不需要溶酶體降解 
不需要將基因轉(zhuǎn)入細胞核中 
專為成熟的(帶5’-Capped和poly-A的)mRNA優(yōu)化的轉(zhuǎn)染試劑 
較好的生物兼容性和極低的生物毒性

1

不像傳統(tǒng)的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù),膜融合不需要胞吞作用來釋放mRNA。內(nèi)含mRNA的Fuse-it的脂載體,能夠快速簡單的與細胞膜相融合,并且將mRNA直接釋放如細胞質(zhì)中。mRNA翻譯工作能夠立即進行,不會受到胞吞,溶酶體降解,或者有絲分裂的影響。

   
1
Fuse-it-mRNA具有令人難以置信的極速mRNA表達。在CHO-K1細胞中6個小時就具有接近99%的表達效率。而傳統(tǒng)的DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)的效率低于10%。
   

Fuse-it-RNA采用與細胞膜一致的電極,能夠有效的和多種細胞系進行膜融合。細胞系,無神經(jīng)元,各種難以轉(zhuǎn)染的原代細胞都能采用膜融合轉(zhuǎn)染試劑將mRNA轉(zhuǎn)入細胞質(zhì)中。Fuse-it-mRNA的膜融合技術(shù)能夠獲得快速高效的蛋白表達而不會對基因組造成影響。

Fuse-it-mRNA操作步驟非常容易掌握,因為融合試劑和mRNA的比例在各個實驗中都是固定的。試劑安全性好,沒有任何基因毒性,操作不需進行嚴格的生物防護。

對比傳統(tǒng)的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,F(xiàn)use-It-mRNA僅僅需要5-20分鐘的孵育時間就能達到較大的mRNA轉(zhuǎn)染效率。不僅如此,僅用很少量的Fuse-it試劑就能獲得較大量的mRNA的轉(zhuǎn)染效率,而不需要額外使用化學(xué)藥劑,這樣對于一些敏感的細胞不會造成細胞毒性。

1 對比于傳統(tǒng)的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù),F(xiàn)use-It-mRNA的膜融合方式不會傷害到細胞。如圖,六小時后,采用Fuse-It-mRNA轉(zhuǎn)染的人正常表皮角細胞(nHEK)已有 表達,而且細胞活性。而采用傳統(tǒng)方法時,六個小時后大量的細胞都已經(jīng)死亡
 

1

2小時內(nèi)就能在細胞中檢測到eGFP的蛋白表達,并且,eGFP表達量在持續(xù)上升并且能持續(xù)穩(wěn)定表達3天以上(90個小時)。

注意:采用成熟的mRNA能獲得理想的實驗結(jié)果(帶5’Capped和3’Poly-A的mRNA).

       

細胞類型

組織

孵育時間

mRNA表達效率

Primary Cells

Bone Marrow-derived Dendritic Cells (BMDCs) murine 20 min 70-80%
Cortical Neurons (embry.) rat 5-15 min 70-90%
Fibroblasts, foreskin human 10-15 min 60-80%
Hepatocytes human 15-25 min 60-80%
HUVEC human 10-20 min 50-70%
Macrophages/Monocytes human 10-15 min 30-50%
Myocytes (embry.) rat 15-25 min 40-60%
Myofibroblasts (embry.) rat 15-20 min 30-50%
N/TERT-1 (keratinocytes, immortalized by expression of TERT) human 10 min 80-90%
nHEK, foreskin human 5-15 min 70-80%
ZNS cells (unpurified) rat 5-15 min 80-99%

Stem Cells

Cor.4U Myocytes (iPSC derived cardiomyocytes) human 10-20 min 80-99%
Dopa.4U (iPSC derived dopaminergic neurons) human 5-10 min 70-90%
iPSC human 10-20 min 70-90%
Peri.4U (iPSC derived peripheral neurons) human 5-10 min 70-90%

Cell Lines

A549 human 20-25 min 80-99%
CHO-K1 hamster 15-20 min 80-99%
HeLa human 15-20 min 70-90%
HL-1
mouse 15-20 min 5-10%
HT-1080 human 15-20 min 80-99%
HUH-7 human 10-15 min 70-90%
Jurkat human  1-2 min   20-50%
L929 mouse 15-20 min 70-90%
MCF-10A human 10-15 min 80-99%
MCF-7 human 15-20 min 70-90%
MDA-MB-231 human 10-15 min 70-90%
MDCK dog 20-25 min 20-40%
NIH-3T3 mouse 15-20 min 70-90%
Rat1 rat 5-10 min 80-99%
RAW 264.7 rat 15-20 min 50-70%
THP-1 human 1-2 min 40-70%
 
       

1

Cortical Neurons (embry.)
Organism: rat
Incubation Time: 15 min
mRNA eGFP

1

Fibroblasts, foreskin
Organism: human
Incubation Time: 15 min
mRNA eGFP

1

Hepatocytes
Organism: human
Incubation Time: 25 min
mRNA LifeAct-TagGFP2

1

THP-1
Organism: human
Incubation Time: 1-2 min
mRNA eGFP
 
     
         

1

HUVEC
Organism: human
Incubation Time: 20 min
mRNA eGFP
       

1

HUVEC
Organism: human
Incubation Time: 20 min
mRNA LifeAct-TagGFP2

1

Myocytes (embry.)
Organism: rat
Incubation Time: 25 min
mRNA eGFP

1

Myofibroblasts (embry.)
Organism: rat
Incubation Time: 20 min
mRNA eGFP
 

1

N/TERT-1 
(keratinocytes, immortalized by expression of TERT)
Organism: human
Incubation Time: 10 min
mRNA eGFP
 

1

ZNS cells (unpurified)
Organism: rat
Incubation Time: 15 min
mRNA eGFP
 

1

nHEK, foreskin
Organism: human
Incubation Time: 20 min
mRNA eGFP

1

nHEK, foreskin
Organism: human
Incubation Time: 20 min
mRNA LifeAct-TagGFP2
 
   
       

1

Cor.4U Myocytes
Organism: human
Incubation Time: 20 min
mRNA eGFP

1

Cor.4U Myocytes
Organism: human
Incubation Time: 20 min
mRNA LifeAct-TagGFP2

1

Dopa.4U
Organism: human
Incubation Time: 10 min
mRNA eGFP

1

iPSC
Organism: human
Incubation Time: 20 min
mRNA eGFP
 

1

Peri.4U
Organism: human
Incubation Time: 10 min
mRNA eGFP
       
       
CHO-K1
Organism: hamster
Incubation Time: 20 min
mRNA eGFP

1

CHO-K1
Organism: hamster
Incubation Time: 20 min
mRNA mCherry

1

HeLa
Organism: human
Incubation Time: 20 min
mRNA eGFP

1


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