光鑷的基本裝置 光鑷的基本裝置包括光鑷光源,光學(xué)耦合器,顯微物鏡,樣品臺(tái)以及一套觀察和記錄光鑷對(duì)微粒的操作過程的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)。‘光鑷微操作儀’是光鑷zui基本的實(shí)驗(yàn)配置。 光鑷微操作儀-光路圖 1光鑷光源,2 光學(xué)耦合器,3反射鏡,4 雙色分束鏡,5 聚焦物鏡NA=1.25,6 樣品臺(tái),7樣品池, 8照明光源,9 CCD數(shù)碼攝像頭,10 計(jì)算機(jī)主機(jī) ,11顯示器。圖4- B為樣品池7的放大圖。 由激光器發(fā)射的激光束,經(jīng)過光學(xué)耦合光路擴(kuò)束整形后,入射到雙色分束鏡,并被反射至物鏡,光經(jīng)過物鏡聚焦在樣品池中形成光阱。裝有微粒或細(xì)胞懸浮液的樣品池置于樣品臺(tái)上。光鑷對(duì)微粒的捕獲和操控過程的觀察,類似于普通的顯微鏡。照明光通過聚光鏡照明樣品池,池中的微粒被捕獲和操控的圖像經(jīng)物鏡后,透過雙色分束鏡,被反射鏡反射到CCD(Charge Coupled Device或電荷耦合器件)數(shù)碼攝像頭,所采集的影像由顯示器顯示,也可通過目鏡進(jìn)行觀察。數(shù)碼攝像頭獲取的信息通過計(jì)算機(jī)采集和處理。 光鑷的基本操控方法  光鑷的基本操作功能是對(duì)微小粒子的捕獲和操控。捕獲即夾持物體;所謂操控,就是使目標(biāo)物體與所在環(huán)境實(shí)現(xiàn)相對(duì)運(yùn)動(dòng),將捕獲的目標(biāo)物體挪動(dòng)到新的目的地。 基于‘光鑷微操作儀’的設(shè)計(jì),目標(biāo)物體與所在環(huán)境實(shí)現(xiàn)相對(duì)運(yùn)動(dòng)的方法是固定光鑷,操控目標(biāo)物體所在環(huán)境,即通過操控樣品臺(tái)帶動(dòng)樣品池中的樣品運(yùn)動(dòng)。 光鑷在橫向(X-Y)操控微粒 光鑷已捕獲了一個(gè)目標(biāo)粒子。固定光束(即光鑷不動(dòng)),沿 平面操控樣品臺(tái)。被捕獲的粒子不動(dòng),背景粒子跟隨樣品臺(tái)移動(dòng),即實(shí)現(xiàn)了光鑷在橫向操控小球,箭頭表示背景的運(yùn)動(dòng)方向。 光鑷在橫向( )操控微粒 光鑷在縱向(Z)操控微粒 通過調(diào)節(jié)物鏡與樣品臺(tái)的相對(duì)位置,實(shí)現(xiàn)光阱的縱向操控。如左圖所示,左側(cè)一粒子已被光阱捕獲,微調(diào)物鏡,改變光阱的縱向位置,被捕獲粒子也隨物鏡移動(dòng),因而仍然保 光鑷在縱向( )操控微粒 持好的成像條件,像依然清晰。而右側(cè)的粒子沒有受到光阱的控制,不隨物鏡一起運(yùn)動(dòng),偏離了成像平面,所以它們的圖像逐漸變得模糊。 光陷阱效應(yīng)和阱域 當(dāng)粒子距光鑷的中心(“十”字指示)有一定距離R時(shí),處在光阱邊緣的粒子將受到光的引力作用,以一定的加速度自動(dòng)滑入光鑷的中心。粒子在完成這一過程中,沒有任何其它外力的驅(qū)動(dòng)(忽略小球的重力)。光阱的阱域就是粒子開始自動(dòng)滑入至光鑷中心的受力范圍。 光陷阱效應(yīng) 圖所示,直徑為2微米的聚苯乙烯小球陷入光阱的過程。 小球距離光阱的中心為R,阱域就是以R為半徑的圓形區(qū)域。 間接操控法 光鑷操控微粒有兩種方式。一種是直接操控,如圖5所示;光鑷可直接操控的粒子從幾十納米到幾十微米。 另一種是間接操控,間接操控方法利用了光阱系統(tǒng)能清晰分辨的微米粒子作為“手柄”,將納米微粒粘附在“手柄”上,使待測(cè)量的納米微粒與小球剛性的連接,用光鑷操控“手柄”達(dá)到操控納米微粒的目的。這種間接操控法使光鑷操控范圍擴(kuò)展到納米尺度,已成為一種有效的單分子納米操控技術(shù)。 光鑷間接操控納米粒子 圖示意為光鑷間接操控納米微粒和生物大分子。“手柄”采用1微米的聚苯乙烯小球,將被測(cè)的納米微粒黏附在“手柄”表面,通過測(cè)量“手柄” 受到的力和產(chǎn)生的位移,計(jì)算納米微粒運(yùn)動(dòng)參數(shù)。 |