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FluorCam封閉式GFP/Chl.熒光成像系統(tǒng)

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FluorCam封閉式GFP/Chl.熒光成像系統(tǒng)

FluorCam封閉式GFP/Chl.熒光成像系統(tǒng)可以為一系列應(yīng)用到綠色熒光蛋白的分子和細胞生物學(xué)研究提供服務(wù)。在封閉式熒光成像系統(tǒng)上安裝了*由軟件控制和電動驅(qū)動的濾波輪,以及一系列的濾光片組,可以對GFP、EGFP、wtGFP、YFP、BFP或者其它波段熒光蛋白和熒光素進行檢測和成像。

FluorCam封閉式GFP/Chl.熒光成像系統(tǒng)也可用于檢測植物發(fā)出葉綠素熒光的動態(tài)變化和空間分布,測量Kautsky效應(yīng)過程、熒光淬滅及其它瞬時熒光過程瞬變)并提供2維熒光圖像。專門設(shè)計的硬件配置使得本系統(tǒng)能夠自動轉(zhuǎn)換成熒光蛋白、熒光素成像或葉綠素熒光檢測成像。該系統(tǒng)高度集成,并且可以進行樣品的暗適應(yīng)。

1.jpg

應(yīng)用領(lǐng)域:

· 熒光蛋白與熒光素的熒光檢測

· 基因轉(zhuǎn)移和生物傳感器技術(shù)

· 轉(zhuǎn)基因植物研究

· 不同基因型抗性篩選

· 植物——微生物交互作用研究

· 植物——原生動物交互作用研究

· 植物光合特性和代謝紊亂篩選

· 生物和非生物脅迫的檢測

· 植物抗脅迫能力或者易感性研究

· 氣孔非均一性研究

· 代謝混亂研究

· 長勢與產(chǎn)量評估

功能特點:

· 操作簡便,測量樣品高度可調(diào),集成了暗適應(yīng)箱,方便被測植物的暗適應(yīng)處理、操作等

· 2.jpg高分辨率CCD,分辨率高達1392×1040像素,快速精確捕捉葉綠素熒光和GFP

· 可進行自動重復(fù)成像測量,可設(shè)置一個實驗程序(Protocols)自動循環(huán)成像測量,成像測量數(shù)據(jù)自動按時間日期存入計算機(帶時間戳)

· 帶有Kautsky誘導(dǎo)效應(yīng)、熒光淬滅分析等各種通用實驗程序(protocols),測量分析參數(shù)達50多個

· 可選配TetraCam彩色成像模塊,大成像面積20×25cm,用于葉片或植物形態(tài)測量分析

典型樣品:

  • 葉片,莖,種子,根,整株小植物

  • 愈傷組織,培養(yǎng)皿中的小苗

  • 果實和花朵

  • 藍細菌,綠藻,細菌

  • 轉(zhuǎn)基因動物

技術(shù)參數(shù):

  • 3.jpg測量參數(shù):Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm',F(xiàn)v/ Fm ,Fv',Ft,ΦPSII,NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qP,QY, QY_Ln,Rfd, ETR等50多個葉綠素熒光參數(shù),每個參數(shù)均可顯示2維熒光彩色圖像

· 具備完備的自動測量程序(protocol),可自由對自動測量程序進行編輯

a) Fv/Fm:測量參數(shù)包括Fo,F(xiàn)m,F(xiàn)v,QY等

b) Kautsky誘導(dǎo)效應(yīng):Fo,F(xiàn)p,F(xiàn)v,F(xiàn)t_Lss,QY,Rfd等熒光參數(shù)

c) 熒光淬滅分析:Fo,F(xiàn)m,F(xiàn)p,F(xiàn)s,F(xiàn)v,QY,ΦII,NPQ,Qp,Rfd,qL等50多個參數(shù)

d) 光響應(yīng)曲線LC:Fo,F(xiàn)m,QY,QY_Ln,ETR等熒光參數(shù)

e) PAR吸收與NDVI(選配)

f) QA再氧化動力學(xué)(選配)

g) GFP等靜態(tài)熒光成像測量

h) OJIP快速熒光動力學(xué)分析(選配):Mo(OJIP曲線初始斜率)、OJIP固定面積、Sm(對關(guān)閉所有光反應(yīng)中心所需能量的量度)、QY、PI等26個參數(shù)

§ 高分辨率TOMI-2 CCD傳感器

a) 逐行掃描CCD

b) 圖像分辨率:1360×1024像素

c) 時間分辨率:在圖像分辨率下可達每秒20幀

d) A/D 轉(zhuǎn)換分辨率:16位(65536灰度色階)

e) 像元尺寸:6.45µm×6.45µm

f) 運行模式:1)動態(tài)視頻模式,用于葉綠素熒光參數(shù)測量;2)快照模式,用于GFP等熒光蛋白和熒光染料測量

g) 通訊模式:千兆以太網(wǎng)

  • 光源板:4塊大型高強度封裝LED光源板,每個光源板由8×9 LEDs陣列,光源板有效面積與成像面積相同13×13cm

  • 測量光:標配617nm紅光,其它波段可選,持續(xù)時間10µs–100µs可調(diào)

  • 雙色光化光: 2紅光(617nm)+2藍光(470nm), Actinic1大光強300µmol(photons)/m2.s,Actinic2大光強2000µmol(photons)/m2.s;大光化學(xué)光可升級至3000µmol(photons)/m2.s

  • 飽和光閃:大光強4000µmol(photons)/m2.s,可升級至6000 µmol(photons)/m2.s

  • 成像面積:13×13cm,可對植物葉片、植物組織、藻類、苔蘚、地衣、整株植物或多株植物、96孔板、384孔板等進行成像分析

  • 4.jpg

  • GFP測量模塊:7位濾波輪及濾波片,用于測量GFP(綠色熒光蛋白)

  • PAR吸收測量模塊(選配):遠紅光740nm(FAR)、660nm雙色LEDs光源板及濾波片,用于測量PAR吸收及NDVI

  • QA在氧化動力學(xué)成像分析(選配):可進行STF熒光動力學(xué)分析測量,單周轉(zhuǎn)光閃(STF)光強達120000 µmol(photons)/m2.s in100µs

  • OJIP快速熒光動力學(xué)模塊(選配):時間分辨率達1µs,可測定分析OJIP曲線與二十幾項相關(guān)參數(shù)包括:Fo、Fj、Fi、P或Fm、Vj、Vi、Mo、Area 、Fix Area、Sm 、Ss、N(QA還原周轉(zhuǎn)數(shù)量)、Phi­­­_Po 、Psi_o 、Phi_Eo、Phi_Do、Phi_pav、ABS/RC(單位反應(yīng)中心的吸收光量子通量)、TRo/RC(單位反應(yīng)中心初始捕獲光量子通量)、ETo/RC(單位反應(yīng)中心初始電子傳遞光量子通量)、DIo/RC(單位反應(yīng)中心能量散失)、ABS/CS(單位樣品截面的吸收光量子通量)、TRo/CSo、RC/CSx(反應(yīng)中心密度)、PIABS(基于吸收光量子通量的“性能”指數(shù)或稱生存指數(shù))、PIcs(基于截面的“性能”指數(shù)或稱生存指數(shù))

  • 紫外LED光源板(選配):365nm或385nm,1)測量多色熒光(詳見FluorCam多光譜熒光成像系統(tǒng));2)測量wtGFP(野生型綠色熒光蛋白)、DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚,一種熒光染料)

  • 藍色LED光源板(選配):470nm,1)測量EGFP(增強型綠色熒光蛋白);2)用于氣孔功能研究

  • 綠色LED光源板(選配):530nm,測量YFP(黃色熒光蛋白)

*測量wtGFP、DAPI、EGFP、YFP等熒光蛋白或熒光染料還需要選配相應(yīng)濾波片

  • FluorCam葉綠素熒光成像分析軟件功能:具Live(實況測試)、Protocols(實驗程序選擇定制)、Pre–processing(成像預(yù)處理)、Result(成像分析結(jié)果)等功能菜單

  • 客戶定制實驗程序協(xié)議(protocols):可設(shè)定時間(如測量光持續(xù)時間、光化學(xué)光持續(xù)時間、測量時間等)、光強(如不同光質(zhì)光化學(xué)光強度、飽和光閃強度、調(diào)制測量光等),具備實驗程序語言和腳本,用戶也可利用Protocol菜單中的向?qū)С绦蚰0孀杂蓜?chuàng)建新的實驗程序

  • 自動測量分析功能:可設(shè)置一個實驗程序(Protocol)自動無人值守循環(huán)成像測量,重復(fù)次數(shù)及間隔時間客戶自定義,成像測量數(shù)據(jù)自動按時間日期存入計算機(帶時間戳)

    快照(snapshot)模式:通過快照成像模式,可以自由調(diào)節(jié)光強、快門時間及靈敏度得到清晰突出的植物樣本穩(wěn)態(tài)熒光和瞬時熒光圖片

  • 5.jpg成像預(yù)處理:程序軟件可自動識別多個植物樣品或多個區(qū)域,也可手動選擇區(qū)域(Region of interest,ROI)。手動選區(qū)的形狀可以是方形、圓形、任意多邊形或扇形。軟件可自動測量分析每個樣品和選定區(qū)域的熒光動力學(xué)曲線及相應(yīng)參數(shù),樣品或區(qū)域數(shù)量不受限制(>1000)

  • 數(shù)據(jù)分析模式:具備“信號計算再平均”模式(算數(shù)平均值)和“信號平均再計算”模式,在高信噪比的情況下選用“信號計算再平均”模式,在低信噪比的情況下選擇“信號平均再計算”模式以過濾掉噪音帶來的誤差

  • 輸出結(jié)果:高時間解析度熒光動態(tài)圖、熒光動態(tài)變化視頻、熒光參數(shù)Excel文件、直方圖、不同參數(shù)成像圖、不同ROI的熒光參數(shù)列表等

  • CCD檢測器帶寬:4001000nm

· 給光制度:靜態(tài)或動態(tài)(竇式)

· 光譜響應(yīng):540nm處量子效率(70 %),400nm和650nm處轉(zhuǎn)降50%

· 讀出噪音:低于12eRMS,典型10e

· 滿阱容量:大于70,000 e (unbinned)

· Bios固件可升級

· 通訊方式:千兆以太網(wǎng)

· 尺寸:471 mm(W)×473 mm (D)×512 mm (H)

· 重量:Appr. 40 kg

· 電源輸入:Appr. 1100 W

· 供電電壓:90–240 V

典型應(yīng)用:

7.jpg

上海生命科學(xué)研究院使用FluorCam測量獲得的GFP成像圖,圖中發(fā)出明亮顏色的植株即為表達了GFP的植株,其顏色越偏向紅色,則表明其表達的GFP更多

8.jpg

鈕扣珊瑚蟲收縮-膨脹不同時相(T1=0分,T2=30分,T3=60分)NDVI與GFP成像分析(Miguel,2014

產(chǎn)地:歐洲



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