琥珀酸脫氫酶染色液(四唑鹽法) 優(yōu)惠高品質(zhì)試劑
產(chǎn)品名稱(chēng)： 琥珀酸脫氫酶染色液(四唑鹽法)
規(guī)格：60ml
用途：琥珀酸脫氫酶染色
注意事項(xiàng)：主要由四氮唑藍(lán)孵育液、陰性對(duì)照組成。染色后酶活性部位呈藍(lán)色沉淀。
儲(chǔ)存條件：4℃,避光,6個(gè)月
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琥珀酸脫氫酶染色液 優(yōu)惠高品質(zhì)試劑
DNA復(fù)制的條件:
1.底物:以四種脫氧核糖核酸(deoxynucleotide triphosphate)為底物,即dATP,dGTP,dCTP,dTTP。
2.模板(template):以親代DNA的兩股鏈解開(kāi)后,分別作為模板進(jìn)行復(fù)制。
3.引發(fā)體(primosome)和RNA引物(primer):引發(fā)體由引發(fā)前體與引物酶(primase)組裝而成。引發(fā)前體是由若干蛋白因子聚合而成的復(fù)合體;引物酶本質(zhì)上是一種依賴(lài)DNA的RNA聚合酶(DDRP)。
4.DNA聚合酶(DNA dependent DNA polymerase, DDDP):
⑴種類(lèi)和生理功能:在原核生物中,目前發(fā)現(xiàn)的DNA聚合酶有三種,分別命名為DNA聚合酶Ⅰ(pol Ⅰ),DNA聚合酶Ⅱ(pol Ⅱ),DNA聚合酶Ⅲ(pol Ⅲ),這三種酶都屬于具有多種酶活性的多功能酶。pol Ⅰ為單一肽鏈的大分子蛋白質(zhì),具有5'→3'聚合酶活性、3'→5'外切酶活性和5'→3'外切酶的活性;其功能主要是去除引物、*缺口以及修復(fù)損傷。pol Ⅱ具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性,其功能不明。pol Ⅲ是由十種亞基組成的不對(duì)稱(chēng)二聚體,具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性,與DNA復(fù)制功能有關(guān)。
在真核生物中,目前發(fā)現(xiàn)的DNA聚合酶有五種。其中,參與染色體DNA復(fù)制的是pol α(延長(zhǎng)隨從鏈)和pol δ(延長(zhǎng)領(lǐng)頭鏈),參與線粒體DNA復(fù)制的是pol γ,polε與DNA損傷修復(fù)、校讀和*缺口有關(guān), pol β只在其他聚合酶無(wú)活性時(shí)才發(fā)揮作用。
⑵DNA復(fù)制的保真性:為了保證遺傳的穩(wěn)定,DNA的復(fù)制必須具有高保真性。DNA復(fù)制時(shí)的保真性主要與下列因素有關(guān):①遵守嚴(yán)格的堿基配對(duì)規(guī)律;②在復(fù)制時(shí)對(duì)堿基的正確選擇;③對(duì)復(fù)制過(guò)程中出現(xiàn)的錯(cuò)誤及時(shí)進(jìn)行校正。
5.DNA連接酶(DNA ligase):DNA連接酶可催化兩段DNA片段之間磷酸二酯鍵的形成,而使兩段DNA 連接起來(lái)。該酶催化的條件是:①需一段DNA片段具有3'-OH,而另一段DNA片段具有5'-Pi基;②
未封閉的缺口位于雙鏈DNA中,即其中有一條鏈?zhǔn)峭暾?③需要消耗能量,在原核生物中由NAD+供能,在真核生物中由ATP供能。
6.單鏈DNA結(jié)合蛋白(single strand binding protein, SSB):又稱(chēng)螺旋反穩(wěn)蛋白(HDP)。這是一些能夠與單鏈DNA結(jié)合的蛋白質(zhì)因子。其作用為:①穩(wěn)定單鏈DNA,便于以其為模板復(fù)制子代DNA;②保護(hù)單鏈DNA,避免核酸酶的降解。
7.解螺旋酶(unwinding enzyme):又稱(chēng)解鏈酶或rep蛋白,是用于解開(kāi)DNA雙鏈的酶蛋白,每解開(kāi)一對(duì)堿基,需消耗兩分子ATP。
8.拓?fù)洚悩?gòu)酶(topoisomerase):拓?fù)洚悩?gòu)酶可將DNA雙鏈中的一條鏈或兩條鏈切斷,松開(kāi)超螺旋后再將DNA鏈連接起來(lái),從而避免出現(xiàn)鏈的纏繞。
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