產(chǎn)品描述:
SFRE Medium 199是對M199培養(yǎng)基的改良，用于原代狒狒腎(Bak)細(xì)胞的生長和維持。培養(yǎng)基在M199培養(yǎng)基基礎(chǔ)上添加了胰島素、丙酮酸鈉、硫酸鋅，并升高了*-鹽酸、半*、*、L -*、L -*、*、*、*和葡萄糖的濃度，使其實現(xiàn)大的無毒活性。SFRE 199 -2還添加了半乳糖，以避免乳酸過度積累，并使pH值在細(xì)胞延長的維持期內(nèi)，保持在生理范圍。
AT090是SFRE 199-2培養(yǎng)基，含有Earle's鹽、L-*、半乳糖和葡萄糖。它不含胰島素，因此在使用前必須單獨添加。對于不同的細(xì)胞系，建議用戶查閱相關(guān)文獻(xiàn)，以了解細(xì)胞所需的培養(yǎng)基添加成分和生理生長的需求。
培養(yǎng)基組成：
成分 mg / L
無機(jī)鹽
二水氯化鈣265.000
無水硝酸鐵0.720
無水*97.720
氯化鉀400.000
醋酸鈉50.000
氯化鈉6800.000
無水*122.000
硫酸鋅七水合物0.100
氨基酸
*100.000
羥*10.000
L-*25.000
L-*鹽酸鹽150.000
L-天冬氨酸30.000
L-半*（游離堿）4.000
L-*75.000
L-*300.000
L-*鹽酸鹽一水合物40.000
L-異*20.000
L-*60.000
L-賴氨酸鹽酸鹽70.000
L-蛋氨酸15.000
L-苯*25.000
L-*40.000
L-*25.000
L-*30.000
L-*10.000
L-*二鈉鹽116.000
L-*25.000
維生素
鈣化醇 0.100
氯化*0.500
D-*0.010
D-Ca-泛酸鹽0.010
DL-生育酚磷酸二鈉鹽0.010
*0.010
L-抗壞血酸0.050
*3 0.016
*0.025
*0.025
吡哆醛鹽酸鹽0.025
鹽酸吡哆醇0.025
*醋酸酯0.140
核黃素0.010
鹽酸硫胺素0.010
肌醇 0.050
對氨基苯甲酸（PABA）0.050
其他
硫酸腺嘌呤10.000
磷酸一腺苷1.000
三磷酸腺苷0.200
*0.200
D（+）半乳糖無水1000.000
D-葡萄糖2000.000
脫氧核糖0.500
*減少0.050
鹽酸*0.300
次黃嘌呤0.354
酚紅10.000
聚*酯80 4.900
核糖0.500
丙酮酸鈉150.000
胸腺嘧啶0.300
*0.300
黃嘌呤0.344
使用方法:
1. 將12.1g懸浮在900ml的組織培養(yǎng)級水中，持續(xù)溫和攪拌，直到粉末*溶解。不要加熱水。
2. 加入2.20g*粉末（TC230）或29.3ml的7.5％*溶液（TCL013）用于制備1L培養(yǎng)基，并攪拌至溶解。
3. 用1N HCl或1N NaOH將pH調(diào)低所需pH值的0.2-0.3 pH單位，因為過濾時pH值會升高。
4. 用組織培養(yǎng)級別水將終體積補足至1000ml。
5. 培養(yǎng)基過濾除菌。采用正壓而非真空將培養(yǎng)基通過0.22微米或更小的無菌膜過濾器。正壓可減少二氧化碳的丟失。
6. 根據(jù)需要，無菌補充無菌添加劑。將無菌培養(yǎng)基分裝至無菌容器中。
7. 將液體培養(yǎng)基保存在2-8°C，避光。
所需材料但未提供：
組織培養(yǎng)級水（TCL010）
*（TC230）
*溶液，7.5％（TCL013）
1N鹽酸（TCL003）
1N氫氧化鈉（TCL002）
胎牛血清（RM1112 / RM10432）
質(zhì)量控制：
外觀
灰白色至乳白色均勻粉末。
可溶性
12.1 g / L的透明溶液。
不含*的pH值
4.70-5.30
用*調(diào)節(jié)pH
7.20 -7.80
不含*的滲透壓
260.00 -300.00
含*的滲透壓
300.00 -340.00
培養(yǎng)反應(yīng)
培養(yǎng)基的促生長能力通過細(xì)胞形態(tài)分析進(jìn)行定性評估，通過細(xì)胞計數(shù)及對照品的比較進(jìn)行定量評估。細(xì)胞至少傳三代。
內(nèi)毒素含量
不超過5EU / ml
儲存和保質(zhì)期：
1.所有干粉培養(yǎng)基和制備好的液體培養(yǎng)基應(yīng)儲存在2-8°C，在效期之前使用。盡管按*條件儲存，個別干粉培養(yǎng)基在某些情況下可能會出現(xiàn)變質(zhì)/降解的跡象。這通過顏色的變化、外觀的變化、顆粒物的存在和溶解后的渾濁表現(xiàn)出來。
2. 不建議制備濃縮培養(yǎng)基。在濃縮培養(yǎng)基中，溶解性較差的游離堿性氨基酸和鹽復(fù)合物含量可能發(fā)生沉淀。
3. 制備好的培養(yǎng)基的pH值和*濃度是影響細(xì)胞生長的關(guān)鍵因素。這也受培養(yǎng)基的量和培養(yǎng)容器體積(表面體積比)的影響。例如在大瓶如Roux瓶中，隨著相當(dāng)體積的CO2釋放，pH值會明顯上升。因此，對于每種細(xì)胞類型，必須確定pH值、*濃度、表面體積比的條件。我們建議嚴(yán)格監(jiān)測pH值。如果需要，可用無菌的1N HCl或1N NaOH或充二氧化碳來調(diào)pH值。
4. 如需要，可在過濾除菌前或除菌后在培養(yǎng)基中補充添加劑，注意無菌防護(hù)措施。培養(yǎng)基的保質(zhì)期將取決于加入培養(yǎng)基中的添加劑的性質(zhì)。
貨號 | 英文品名 | 中文名 | 規(guī)格 | 儲存條件 |
AT090 | SFRE Medium 199-2 (With Earle's Salts, L-Glutamine, Galactose and Glucose, Without Sodium bicarbonate and Insulin) | SFRE 199 -2培養(yǎng)基 (含有Earle's鹽、*、半乳糖和葡萄糖, 不含*和胰島素) | 1L, 5L, 10×1L, 20L | 2-8°C |
