大鼠β羥丁酸(βOHB)ELISA檢測(cè)試劑盒的適用領(lǐng)域，標(biāo)本要求，操作步驟及其他咨訊說(shuō)明由上海古朵生物提供，本司所供應(yīng)的ELISA試劑盒種屬齊全，提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，除了ELISA試劑盒外我們還提供了生化試劑，動(dòng)物血清，標(biāo)準(zhǔn)品，對(duì)照品，培養(yǎng)基，抗體，染色液，溶液，緩沖液，實(shí)驗(yàn)耗材，化學(xué)試劑及其他試劑等，歡迎選購(gòu)！
大鼠β羥丁酸(βOHB)ELISA檢測(cè)試劑盒詳細(xì)說(shuō)明
【信息說(shuō)明】
中文名：大鼠β羥丁酸(βOHB)ELISA試劑盒
中文別名：大鼠β羥丁酸(βOHB)ELISA Kit
供應(yīng)商：上海古朵
規(guī)格：48t/96t
保存：2-8℃
有效期：6個(gè)月
檢測(cè)原理：狗膽囊收縮素(CCK)ELISA試劑盒采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
用途：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。
特點(diǎn)：敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便。
預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測(cè)定人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中IL-38含量。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本，例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。
【適用領(lǐng)域】
1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位
2、研究抗酶抗體的合成
3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)
4、定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份
【樣本處理】
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1、血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
2、血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
3、尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4、檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/ 分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。
通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5、組織標(biāo)本：
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。
離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
【操作步驟】
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，依次進(jìn)行稀釋數(shù)倍。
1、加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。
在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
2、溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
3、配液：將30倍（48T 的20 倍）濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
4、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
5、加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
6、溫育：操作同3。
7、洗滌：操作同5。
8、顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘。
9、終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
10、測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）； 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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標(biāo)簽：大鼠β羥丁酸(βOHB)ELISA檢測(cè)試劑盒 大鼠β羥丁酸(βOHB)ELISA試劑盒
