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真核基因轉(zhuǎn)染

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真核基因轉(zhuǎn)染
細胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA,RNA等導入真核細胞的技術(shù)。目前,將外源物質(zhì)導入細胞的方法主要分為三大類:1、脂質(zhì)體(或是脂質(zhì)體替代物)轉(zhuǎn)染;2、電轉(zhuǎn);3、病毒感染。轉(zhuǎn)染技術(shù)又可分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染

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真核基因轉(zhuǎn)染

細胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA,RNA等導入真核細胞的技術(shù)。目前,將外源物質(zhì)導入細胞的方法主要分為三大類:1、脂質(zhì)體(或是脂質(zhì)體替代物)轉(zhuǎn)染;2、電轉(zhuǎn);3、病毒感染。轉(zhuǎn)染技術(shù)又可分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染

 

一、真核基因轉(zhuǎn)染服務介紹

細胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA,RNA等導入真核細胞的技術(shù)。目前,將外源物質(zhì)導入細胞的方法主要分為三大類:1、脂質(zhì)體(或是脂質(zhì)體替代物)轉(zhuǎn)染;2、電轉(zhuǎn);3、病毒感染。轉(zhuǎn)染技術(shù)又可分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染

基因的功能研究可分為loss-of-function和gain-of-function,即通過過表達該基因和抑制內(nèi)源基因的表達的手段來研究某個基因的生物學功能。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類,一類是瞬時轉(zhuǎn)染,一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染(*轉(zhuǎn)染)。

 

 

瞬時轉(zhuǎn)染

 

服務介紹

通過脂質(zhì)體介導轉(zhuǎn)染法基因轉(zhuǎn)染技術(shù),將靶基因?qū)爰毎话阍谵D(zhuǎn)染后48小時左右,靶基因即可在細胞內(nèi)表達。根據(jù)不同的實驗目的,48小時后即可進行靶基因表達的檢測等實驗。觀察目的基因及其表達蛋白在某種細胞中的功能(短時間即可進行觀察,但效應會很快丟失)

 

真核基因轉(zhuǎn)染服務流程

1、接收質(zhì)粒、細胞

2、細胞培養(yǎng)

3、轉(zhuǎn)染

4、拍照

5、效率鑒定

 

客戶提供:

1、構(gòu)建好的外源基因載體,或由本公司進行載體構(gòu)建(需提供目的基因名稱、種屬、序列或Gene Accession Number)。

2、待轉(zhuǎn)染的細胞系(1×106個細胞,可傳代,倍增時間小于48小時)以及細胞培養(yǎng)條件的說明。

3、若需要檢測靶基因的表達,需提供相應抗體或由公司代購。

交付內(nèi)容

1、構(gòu)建好的瞬時轉(zhuǎn)染細胞。

2、實驗報告:詳細實驗步驟及相關(guān)的外源基因表達分析。

 

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞株的構(gòu)建

 

服務介紹

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,就是轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒DNA整合到宿主細胞染色體上,使宿主細胞可*表達目的基因及蛋白。需要在瞬時轉(zhuǎn)染基礎(chǔ)上對靶細胞進行篩選或者應用高轉(zhuǎn)染效率的病毒,根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標志選用相應的藥物進行細胞傳代,從而得到可穩(wěn)定表達目的基因的細胞系。

 

服務流程

1、接收質(zhì)粒、細胞

2、細胞培養(yǎng)

3、轉(zhuǎn)染

4、抗生素篩選

5、得到單克隆細胞株

6、擴增

7、檢測

 

客戶提供

1、構(gòu)建好的外源基因載體,或選擇由公司構(gòu)建(價格參考載體構(gòu)建)。

2、待轉(zhuǎn)染的細胞系(1×106個細胞,可傳代,倍增時間小于48小時)以及細胞培養(yǎng)條件的說明。

3、提供相應抗體

 

交付內(nèi)容

1、構(gòu)建好的穩(wěn)定表達細胞系。

2、實驗報告:詳細步驟、相關(guān)的外源基因表達分析等。

 

二、服務列表

 

項目備注周期
瞬時轉(zhuǎn)染+鑒定鑒定方法為western blot10個工作日
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染+鑒定鑒定方法為western blot45個工作日(貼壁細胞)


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