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iTRAQ實驗外包服務(wù)

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背景簡介:iTRAQ和TMT的技術(shù)原理*一樣,所不同的是二者的分子結(jié)構(gòu)有差異。與SILAC相比(標(biāo)記蛋白質(zhì)),iTRAQ和TMT是對肽段進(jìn)行標(biāo)記的。依據(jù)iTRAQ/TMT標(biāo)簽的質(zhì)量數(shù)差異,通過MS實現(xiàn)對多組樣品中的蛋白質(zhì)進(jìn)行相對定量:SILAC是通過一級MS( MSl)對蛋白質(zhì)進(jìn)行定量,而iTRAQ/TMT是通過二級MS( MS/MS.MS2)進(jìn)行定量的;iTRAQ/TMT幾乎能兼容所有來源的蛋白質(zhì)樣品,并且能同時分析多達(dá)8-10組的樣品,分析通量高。

iTRAQ實驗外包服務(wù)

 

iTRAQ實驗外包服務(wù)流程

1、分別提取蛋白質(zhì)并定量;

2、Trypsin分別對蛋白進(jìn)行酶解,提取肽段;

3、用不同質(zhì)量數(shù)的iTRAQ/TMT標(biāo)簽分別對肽段樣品進(jìn)行標(biāo)記:

4、標(biāo)記完成后,混合樣品,用SCX進(jìn)行組分分離(15-20組分);

5、對每個組分進(jìn)行LC-MS分析:     

6、蛋白質(zhì)鑒定與定量分析,篩選差異表達(dá)的蛋白;            

7、生物學(xué)實驗驗證(Western blot,EUSA等)。                          

 

目前,基爾頓生物主營實驗技術(shù)服務(wù),歡迎廣大科研愛好者前來咨詢!


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