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膽固.醇、脂肪酸和甘油的分析方法：

SRM 1950血漿采用NIST同位素稀釋(ID)氣相色譜質(zhì)譜(ID-GC-MS)確定法測定膽固.醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)[7.8]。該方法是根據(jù)墮.胎醫(yī)學(xué)可追溯性聯(lián)合委員會(JCTLM)[9]批準(zhǔn)的高階參考測量方法。該方法用乙醇中氫氧化鉀(KOH)水解膽固.醇酯，然后用己烷萃取，再用雙(三甲基硅烷基)乙酰胺衍生化膽固.醇，以膽固.醇-25，26，27-C為內(nèi)標(biāo)。表1列出了認(rèn)證的值。

總甘油的質(zhì)量濃度(如三油酸)的值分配是基于NIST ID-GC-MS權(quán).威方法[10]。該方法被JCTLM認(rèn)為是一種高階參考測量方法.方法包括用乙醇KOH水解甘油三酯，去離子化，在吡啶中與丁基硼酸發(fā)生反應(yīng)，并以N-methy-N-三甲基甲硅烷基三氟乙.酰胺1，2，3-1C；衍生化為內(nèi)標(biāo)，總甘油的認(rèn)證值列于表1。

脂肪酸的測定(NIST)：

SRM 1950血漿采用兩種不同的萃取方法和兩種分析方法(標(biāo)準(zhǔn)值為SCE 表2，參考值為表3)測定了SRM 1950中脂肪酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。第二組用甲醇中的氧化鈉處理，然后用三氟.化硼[11]。用火焰離子化檢測(FID)和氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)對兩組樣品進(jìn)行氣相色譜分析。采用0.25 mm×100 m雙氰丙基聚硅氧烷(FID)為色譜柱，采用含50%氰基丙基聚硅氧烷(摩爾分?jǐn)?shù))的0.25mm×60m熔融石英毛細(xì)管柱進(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜。

脂肪酸的測定：

在Langerstedt方法[12]的基礎(chǔ)上，SRM 1950血漿采用ID-GC-MS法測定了總脂肪酸[12](標(biāo)準(zhǔn)值見表2，參考值見表3)。該過程是以膽.固醇酯、甘油三酯和磷脂為原料，在熱存在下，用量子化學(xué)加成：鹽酸和甲醇：羥基化鈉水解脂肪酸?！翱傊舅嵩诿?xì)管柱(30m×0.25 mm×0.25)上以五氟芐基溴(PFB)萃取、濃縮、衍生，再用10種同位素標(biāo)記的內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)重新構(gòu)成24種脂肪酸WERC。負(fù)化學(xué)電離導(dǎo)致脂肪酸-PFB酯的碎裂，在毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm×0.25)上形成一個(gè)以氦為載體的陰離子。

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