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豬低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒測定步驟

時間:2020/9/10閱讀:640
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  豬低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒測定步驟
 
  1.加樣
 
  1. 除包被外都需45度加樣
 
  2.加樣體積要準確
 
  3.管底加樣,不能加在管壁上
 
  4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
 
  2.溫浴
 
  1.加標本后和加結(jié)合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
 
  2.各ELISA板不應疊在一起。
 
  3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
 
  4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
 
  3.洗滌
 
  1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
 
  2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
 
  4.讀板
 
  1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
 
  2.如用酶標儀測定結(jié)果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

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