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動物血清的分離技術(shù)有哪些?

時間:2018-7-30閱讀:2086
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血清分離,看你的要求,對于溶血程度,是否要求無菌等等,看你那的有要求什么的;用我的經(jīng)歷舉例,我們的要求是盡可能無菌或減少污染,除了超凈工作臺之類的,我所通用的;

 

一、通過自然凝固的方法:

1、對于血液自然分離來說,選擇呈裝的材質(zhì)hao是玻璃材質(zhì),它的分離效果要比塑料的材質(zhì)好;

2、室外的溫度不能過低,hao是25-30℃,因為由于血液體內(nèi)的溫度是37℃,到體外室溫低的話,由于熱脹冷縮,細(xì)胞破裂多,溶血后,血紅素溢出會溶血增加;

3、有條件的話,而且容器也不大的情況下,可以放置恒溫箱中30分鐘-1.5個小時,如果能傾斜30度左右放置,效果更好,但是hao不要超過2個小時,不然溶血也會增加;

4、沒有條件,可以室溫傾斜放置過夜,第二天同樣能得到淡黃色的血清;

5、為了得到更多的血清,這個時候我會移出血清,然后剩余的血塊再3000rpm離心15-20分鐘,這樣還能得到一點;然后剩余的血塊再放置在4℃冰箱再過夜,還能獲得一些血清,但是這個時候的血清已經(jīng)是溶血的血清了;

 

二、通過離心的方法:(加抗凝劑)

1、高速離心機(3000-12000rpm),離心不宜超過3000rpm,因為容易溶血,我一般2000rpm15分鐘,因為我要除了要血漿外,還要完整的血細(xì)胞;

2、血漿再7000rpm,就能獲得理想的血漿量了;備注:我的呈裝的容器是250ml葡萄糖瓶,因為需要無菌,所以都是分裝后,然后上丁基膠塞離心或者自然分離;還有般情況下,自然析出的血清一般占總血的量35-45%;但是血漿的話,血漿占總血液體積的60-70%,量很可觀。

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