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瓊脂糖凝膠2B Sepharose 2B使用說(shuō)明書(shū)

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產(chǎn)品名稱: 瓊脂糖凝膠2B

英文名稱: Sepharose 2B

外觀:本品為乳白色球狀凝膠,無(wú)嗅、無(wú)味、無(wú)肉眼可見(jiàn)雜質(zhì)。

包裝:產(chǎn)品以聚胺酯瓶密封包裝,外貼標(biāo)簽,注明“品名、體積、顆粒大小”等內(nèi)容。

貯存:產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4℃~25℃(保存溶液為20%乙醇),通風(fēng)、干燥、清潔的地方。不能冷凍。用過(guò)的柱子貯存在4℃(20%乙醇)

注意事項(xiàng):本品應(yīng)避免與氧化劑接觸,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中

運(yùn)輸:運(yùn)輸中應(yīng)避免日曬、雨淋、重壓,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。

保質(zhì)期 :5年

 

2. 理化指標(biāo)

項(xiàng)       目

指       標(biāo)

基質(zhì)

 

 

2%瓊脂糖凝膠

排阻極限

70000~40×106 (球蛋白)

形狀

球型

粒徑

60~200 μm

zui高流速

110 cm/h*

耐壓

0.03 MPa

耐熱

pH7水中45℃24h

pH適用范圍

4~9 (長(zhǎng)時(shí)間), 3~11(短時(shí)間,在位清洗)

化學(xué)穩(wěn)定性

可耐8mol/L尿素、6mol/L鹽酸胍

*檢測(cè)條件: 層析柱10mm×300mm  *柱床高15cm,25℃, 流動(dòng)相為0.1mol/LNaCl

 

應(yīng)用:本產(chǎn)品為傳統(tǒng)的瓊脂糖介質(zhì),非特異性吸附低,回收率高,可多次重復(fù)使用等特點(diǎn),用于分子量差異大、對(duì)分辨率要求不高的樣品的凝膠層析純化。下面簡(jiǎn)要介紹介質(zhì)的使用過(guò)程

 

裝柱

凝膠過(guò)濾介質(zhì)的使用對(duì)裝柱的要求較高,為了保證分離效果,一般通過(guò)柱子上加一個(gè)裝柱器來(lái)使分離柱裝滿凝膠,或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進(jìn)行檢驗(yàn)。

以下過(guò)程為通用介質(zhì)裝填過(guò)程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子,可在柱床穩(wěn)定后將柱床壓緊,接好管路。

⑴讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫。配制緩沖液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液。

⑵選擇一根一定直徑的柱子,長(zhǎng)約30~60cm,根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠(約為柱床體積的1.15倍),清洗掉20%乙醇,抽干,用緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。勻漿作脫氣處理。不要?jiǎng)×覕噭?dòng),以免攪壞微球。

⑶將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務(wù)必使底端無(wú)氣泡。

⑷  用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開(kāi)柱子出液口,使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,連結(jié)好柱子頂端柱頭。

⑸ 打開(kāi)蠕動(dòng)泵,讓緩沖液緩慢流過(guò),使柱床穩(wěn)定。

⑹用一個(gè)裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平,上好柱頭。

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